賽默飛經(jīng)典型HPLC分析柱表示化學試劑的純度，是可在高效液相色譜中使用的試劑的純度，制備色譜法、平行分析或梯度分析需要使用到不同的HPLC級試劑。對于HPLC流動相的處理和使用注意事項討論主要圍繞在流動相的制備和使用中應(yīng)采取的措施。對于樣品過濾的重要性討論主要圍繞在進樣時清潔樣品的好處。
當采用色譜分析進行方法建立時，專屬性是必然需要考慮的問題之一，相關(guān)的指導原則明確要求提供專屬性圖譜，并對成分進行標注。在有關(guān)物質(zhì)方法開發(fā)時，毫無疑問，所有的雜質(zhì)均需要進行相互有效分離；盡管有時無法達到基線分離，但至少達到分離度1.0~1.2，或者設(shè)置峰谷比的限制，以滿足定量檢測要求。而以各種主客觀理由陳述雜質(zhì)無法分離，采用兩個雜質(zhì)（無法分離，重合為一個色譜峰）合并計算的方式，已有被CDE發(fā)補案例。因此，對于專屬性，色譜分離是無法回避的要求。
HPLC級溶劑的純度通常超過99.9％，并且瓶身標簽上還會標明其他雜質(zhì)的含量。但是雜質(zhì)會導致多余的峰，從而干擾色譜圖中的主峰，對我們的分析結(jié)果產(chǎn)生干擾。雜質(zhì)產(chǎn)生的原因有很多，可能溶劑純度不夠，可能是瓶身不干凈或者軟管不干凈，還可能是溶劑吸濾頭的過濾雜質(zhì)效果不好。恒譜生不銹鋼流動相進樣口過濾器能安全有效地保護泵和止回閥，尺寸小，適用于各種品牌的HPLC系統(tǒng)和多種小瓶口的存儲池容器。吸濾阻力較小，幾乎沒有背壓和形成空化，兼容多種流動相管路，無需換吸濾頭即可配不同規(guī)格的吸管，過濾微粒污染物效果好，無氣泡，溶劑利用率高。
樣品在注入液相系統(tǒng)前，必須選擇一種合適的HPLC溶劑。在反相高效液相色譜中，當樣品溶劑與流動相的洗脫強度有差異，尤其是前者的洗脫強度較強時，就會產(chǎn)生峰的變形及柱效的降低。解決該問題有效的方法是使用流動相作為溶劑溶解樣品，這樣既可以避免樣品溶劑和流動相之間任何強度或粘度的不匹配，也可以減少樣品分析時基線的漂移。溶劑在流動相中起著重要的作用，并有助于將進樣品通過分離柱后輸送到檢測器。為了滿足不同的分析要求，可以購買不同純度等級的溶劑來使用，HPLC分析需要使用Z高純度的溶劑，但是同時也要考慮成本和實用性等方面。
